多肽的分离制备，如何上量？如何增大分离度?
反相HPLC应当是很好的分离小肽方法，用CH3CN或CH3OH：H2O（95：5）做流动相，看保留如何，若无保留，高压制备色谱系统哪家效果好，建议改用其他色谱方法进行分离。
关于多肽的分离，高压制备色谱系统报价，首先要知道它的分子量大小，然后选择不同类型的填料，如孔径的大小。我们先在分析柱（4.6mm内径）上做一下实验，找到很大的分离度，这一过程的难度是很大的，要不断地改变流动相和固定相，然后再线性或非线性放大到制备，放大的倍数按分析柱的实验结果。分离后可以通过冷冻干燥得到固体。
还可以考虑离子交换来分l离。
样品如果溶解度太低如何上制备HPLC？
（1）了解一下样品的性质，根据其酸碱性，极性等性质，通过调节溶剂的pH值等，以达到较好的溶解度。
（2）样品可能某种晶型难溶，高压制备色谱系统费用，这样可以加入其他溶剂以助溶。
（3）不是一定要用流动相来溶解样品，对溶解度差的样品，可以选择甲醇，THF或DMSO等溶解样品。特别是DMSO，对一般的化合物溶解度都很好。并且在反相柱上不保留，不会造成干扰。而且DMSO的洗脱能力很弱，高压制备色谱系统，一般不会影响峰型。
（4）可以固体上样。
制备色谱柱如何测柱效？
可以选择几种物质，苯，萘、蒽等的衍生物上柱，流动相一般用65-80%的甲醇/水，测定后根据保留时间计算塔板数。由于制备色谱的管路死体积一般比较大，很难得到和供应商相同的柱效。建议在制备柱开始使用时在自己的色谱上测一下柱效，然后定期检测柱效进行以进行比较。
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